Identification d’un transcrit alternatif du gène CD20 dans les hémopathies B, codant pour une nouvelle protéine et impliqué dans les résistances au Rituximab. Cible potentielle en immunothérapie anti-tumorale (Identification of an alternative CD20 transcript variant in B-cell malignancies coding for a novel protein associated to rituximab resistance. Potential target in an anti-tumoral immunotherapy approach)

Henry-Dunand , Carole - (2010-12-16) / Université de Franche-Comté - Identification d’un transcrit alternatif du gène CD20 dans les hémopathies B, codant pour une nouvelle protéine et impliqué dans les résistances au Rituximab. Cible potentielle en immunothérapie anti-tumorale en : Français Directeur(s) de thèse:  Ferrand, Christophe Laboratoire : Interaction hôte-greffon Ecole doctorale : HES Classification : Médecine et santé

URL d'accès :  http://indexation.univ-fcomte.fr/nuxeo/site/esupve... Mots-clés : CD20, Rituximab, épissage alternatif, immunothérapie anti-tumorale Résumé : Dans le cadre de l’utilisation du système « gène suicide » en thérapie génique, le gène de susceptibilité HSV-tk avait été utilisé dans une approche de modulation de l’alloréactivité après greffe de moelle osseuse. Ce modèle a montré ses limites et notre laboratoire s’est orienté vers l’utilisation du système CD20/Rituximab (RTX). En tant que protéine membranaire, la molécule CD20 permet un tri des cellules génétiquement modifiées ; de plus elle est la cible d’un anticorps monoclonal, le RTX, permettant la lyse des cellules exprimant cet antigène. Dans cette thématique, nous nous sommes intéressés à l’existence d’une population de lymphocytes T exprimant CD20. En effet, la molécule CD20 normalement exprimée sur les lymphocytes B, a été décrite, comme étant présente sur un petit contingent de LT. Nous avons émis l’hypothèse que cette population pouvait être un artefact observé en cytométrie en flux. Dans un deuxième temps, un épissage alternatif du gène CD20 a été mis en évidence au laboratoire, codant un ARNm tronqué (nommé ΔCD20). Cet ARNm est lié à l’activation et/ou à la transformation cellulaire. Ce travail a donc consisté en la caractérisation de cet ARNm ΔCD20 et en la mise en évidence de la protéine codée par cet ARNm. CD20 étant la cible du traitement par RTX, nous avons également mis en relation la présence de cet ARNm avec les résistances au traitement. La dernière partie des résultats concerne l’exploration d’une approche d’immunothérapie anti-tumorale ciblant cette protéine ΔCD20. Nous avons ainsi généré des LT spécifiques de ΔCD20. Le but à long terme de cette stratégie serait d’améliorer le traitement des patientsréfractaires au traitement par RTX et/ou en rechute. Résumé (anglais) : Within the framework of the use of the "gene-suicide" system, the gene of susceptibility HSV-tk had been used to modulate alloreactivity after bone-marrow transplantation. This model showed its limits and our laboratory turned to the use of the CD20/Rituximab (RTX) system. Indeed, as a membrane protein, the molecule CD20 allows a cell sorting of the genetically modified cells; furthermore it is the target of a monoclonal antibody, the RTX, allowing the lysis of the cells expressing this antigen. In this context, we were interested in the existence of a population of T lymphocytes expressing the CD20 molecule. Indeed, the molecule CD20 normally expressed on B cells was described, in the literature, as being present on a small contingent of T cells. We emitted the hypothesis that this population could be an artefact observed in flow cytometry. Secondly, an alternative splice of the CD20 gene was brought to light in the laboratory, coding a truncated mRNA called deltaCD20 (ΔCD20). This mRNA is connected to the activation and\or cellular transformation. This work thus consisted of the characterization of this mRNA ΔCD20 and in the revealing of the protein coded by this mRNA. CD20 being the target of the treatment by RTX, we also put in relation the presence of this mRNA with the RTX resistances in vitro and in vivo. The last part of the results concerns the exploration of an anti-tumoral immunotherapy approach targeting this protein ΔCD20, expressed in B cells malignancies and potentially involved in RTX resistances. We so generated CD20 specific T cells. The long-term purpose of this strategy would be to improve the treatment of refractory patients and\or in relapse after RTX treatment. Identifiant : UFC-43

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